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分析化學(xué)提取凈化之(一)氮吹儀,固相萃取儀的使用

點(diǎn)擊次數(shù):3960 更新時間:2018-08-20

         

引言

分析化學(xué)是人們獲得物質(zhì)化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)信息的科學(xué),它是研究物質(zhì)化學(xué)組成的表征和測量的科學(xué),是化學(xué)學(xué)科的重要分支,它所解決的問題是物質(zhì)是什么組分組成的,這些組分在物質(zhì)中是如何存在的,以及各組分的含量有多少。

分析化學(xué)是研究物質(zhì)及其變化規(guī)律的重要方法之一,它在人們的生活生產(chǎn)中發(fā)揮著重要的作用。

1分析化學(xué)與食品安全

2009年2月28日第十一屆全國人民代表大會常務(wù)委員會第七次會議通過了《中華人民共和國食品安全法》,以此保證食品安全,保障公眾身體健康和生命安全。食品安全是一個相對的概念,所謂不安全的食品就是指人們食用以后出現(xiàn)的各種不適感覺或者長期積累引起某些異常的代謝。

利用分析化學(xué)手段對食品的成分、性質(zhì)等進(jìn)行測定是分析化學(xué)的一大類應(yīng)用,更是食品安全的有效保障。2008年的奶粉事件一方面充分暴露出我國在食品安全上的漏洞,另一方面也必將推動分析化學(xué)的繼續(xù)發(fā)展。

三聚氰胺(Melamine),是一種三嗪類含氮雜環(huán)有機(jī)化合物,重要的氮雜環(huán)有機(jī)化工原料。目前,三聚氰胺被認(rèn)為毒性輕微。但動物長期攝人三聚氰胺會造成zhengzhi、泌尿系統(tǒng)的損害,膀胱、腎部結(jié)石,并可進(jìn)一步誘發(fā)膀胱癌。對于原料乳與乳制品中三聚氰胺含量的測定,標(biāo)準(zhǔn)《原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法》(GB/T 22388-2008)中選用了液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法。

方法:液相色譜法測定原料乳與乳制品中三聚氰胺含量

1.1原理

用三lu乙suan溶液-乙腈提取試樣,經(jīng)陽離子交換固相萃取柱凈化后,用液相色譜測定,外標(biāo)法定量。

1.2試劑與材料

甲醇、乙腈、25%~28%的氨水、三lu乙suan、檸檬suan、辛烷磺suan鈉、甲醇水溶液(含50mL甲醇和50mL水)、三lu乙suan溶液(1%)、氨化甲醇溶液(5%)、離子對試劑緩沖液(由檸檬suan和辛烷磺suan鈉配制)、三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品(CAS108-78-01,純度>99.0%)、三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)儲備液(1mg/mL)。所有試劑均為分析純,水為GB/T 6682規(guī)定的一級水。陽離子交換固相萃取柱、定性濾紙、海砂、微孔濾膜、氮?dú)猓兌?ge;99.999%)

1.3儀器和設(shè)備

液相色譜(HPLC)儀、分析天平、離心機(jī)、超聲波水浴器、固相萃取裝置、氮?dú)獯蹈蓛x、渦旋混合器、50mL具塞塑料離心管、研缽

1.4樣品處理

1.4.1提取

①液態(tài)奶、奶粉、suan奶、冰淇淋和奶糖等。

稱取2g(至0.01g)試樣于50mL具塞塑料離心管中,加入15mL三lu乙suan溶液和5mL乙腈,超聲提取10min,再振蕩提取10min后,以不低于4000r/min離心10min。上清液經(jīng)三lu乙suan溶液潤濕的濾紙過濾后,用三lu乙suan溶液定容至25mL,移取5mL濾液,加入5mL水混勻后做待凈化液。

②奶酪、奶油和巧克力等。

稱取2g(至0.01g)試樣于研缽中,加入適量海砂(試樣質(zhì)量的4倍~6倍)研磨成干粉狀,轉(zhuǎn)移至50mL具塞塑料離心管中,用15mL三lu乙suan溶液分?jǐn)?shù)次清洗研缽,清洗液轉(zhuǎn)入離心管中,再往離心管中加入5mL乙腈,超聲提取10min,再振蕩提取10min后,以不低于4000r/min離心10min。上清液經(jīng)三lu乙suan溶液潤濕的濾紙過濾后,用三lu乙suan溶液定容至25mL,移取5mL濾液,加入5mL水混勻后做待凈化液。

若樣品中脂肪含量較高,可以用三lu乙suan溶液飽和的正己烷液-液分配除脂后再用SPE柱凈化。

1.4.2凈化

將待凈化液轉(zhuǎn)移至固相萃取柱中。依次用3mL水和3mL甲醇洗滌,抽至近干后,用6mL氨化甲醇溶液洗脫。整個固相萃取過程流速不超過1mL/min。洗脫液于50℃下用氮?dú)獯蹈?,殘留物(相?dāng)于0.4g樣品)用1mL流動相定容,渦旋混合1min,過微孔濾膜后,供HPLC測定。

1.5液相色譜測定

1.5.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

用流動相將三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)儲備液逐級稀釋得到的濃度為0.8、2、20、40、80μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液,濃度由低到高進(jìn)樣檢測,以峰面積-濃度作圖,得到標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程。

1.5.2定量測定

待測樣液中三聚氰胺的響應(yīng)值應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍內(nèi),超過線性范圍則應(yīng)稀釋后再進(jìn)樣分析。

1.6空白實(shí)驗(yàn)

除不稱取樣品外,均按上述測定條件和步驟進(jìn)行。

本方法的定量限為2mg/kg。在添加濃度2mg/kg~10mg/kg濃度范圍內(nèi),回收率在80%~110%之間,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10%。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的差值不得超過算術(shù)平均值的10%。

 

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